兩性離子緩沖液,即Good’s緩沖液,是一系列N-取代氨基磺酸,具有很好的pH穩定性,對多種化學試劑和酶是惰性。其中,嗎啉系列緩沖劑包括MES,MOPS和MOPSO,均屬于Good’s緩沖液,它們不與大多數金屬離子形成絡合物,因此適用于含有金屬離子的溶液。但它們分別具體用在哪些實驗中呢?本文將為大家進行總結。
MES
化學名2-(N-嗎啉基)乙磺酸,分子式C6H13NO4S,25°C下pKa為6.1,pH緩沖范圍5.5~6.7。其具體可用實驗如下:
(1)生物緩沖液,可用來替代高毒性的二甲胂酸鹽,以及離子緩沖液檸檬酸鹽和蘋果酸鹽;
(2)通常用于細菌、酵母和哺乳動物細胞的緩沖培養基。高濃度的MES對于大多數植物是有毒的,但是在濃度為?10mM時可用于植物培養基中;
(3)作為在培養基中研究Tau蛋白的緩沖液;
(4)由于在高濃度下離子遷移率和電導率低,可用于許多類型的電泳和色譜,包括毛細管電色譜、凝膠過濾色譜、磷酸纖維素柱色譜、疏水作用色譜、陽離子交換色譜法和SDS-PAGE;
(5)可以與有機錫(IV)分子復合作為抗腫瘤劑。
(2)通常用于細菌、酵母和哺乳動物細胞的緩沖培養基。高濃度的MES對于大多數植物是有毒的,但是在濃度為?10mM時可用于植物培養基中;
(3)作為在培養基中研究Tau蛋白的緩沖液;
(4)由于在高濃度下離子遷移率和電導率低,可用于許多類型的電泳和色譜,包括毛細管電色譜、凝膠過濾色譜、磷酸纖維素柱色譜、疏水作用色譜、陽離子交換色譜法和SDS-PAGE;
(5)可以與有機錫(IV)分子復合作為抗腫瘤劑。
MOPS
化學名稱3-(N-嗎啡啉)丙磺酸,分子式C7H15NO4S,25°C下pKa為7.14,pH緩沖范圍為6.5~7.9。具體可用實驗如下:
(1)作為電泳中的運行緩沖液和用于色譜中的蛋白質純化;
(2)配制成多種瓊脂培養基,用于細菌,酵母和哺乳動物細胞的培養。但是,高于20mM的濃度不推薦用于哺乳動物細胞;
(3)可用作大腸桿菌細胞的裂解緩沖液;
(4)作為凝膠過濾色譜中的洗脫液;
(5)應用于Northern雜交,作為RNA的分離和轉膜時的緩沖液;
(6)適用于二喹啉甲酸(BCA)測定;
(7)用于葉綠體薄層備樣的電子傳遞和磷酸化研究。
(2)配制成多種瓊脂培養基,用于細菌,酵母和哺乳動物細胞的培養。但是,高于20mM的濃度不推薦用于哺乳動物細胞;
(3)可用作大腸桿菌細胞的裂解緩沖液;
(4)作為凝膠過濾色譜中的洗脫液;
(5)應用于Northern雜交,作為RNA的分離和轉膜時的緩沖液;
(6)適用于二喹啉甲酸(BCA)測定;
(7)用于葉綠體薄層備樣的電子傳遞和磷酸化研究。
MOPSO
化學名稱3-(N-嗎啉基)-2-羥基丙磺酸,分子式C7H15NO5S,25°C下的pKa為6.87,pH緩沖范圍6.2~7.6。具體可用實驗如下:
(1)用作毛細管電泳中的載體電解質,以及谷胱甘肽合成酶的結晶緩沖劑;
(2)在熒光光譜法,分光光度法和等溫滴定量熱法中使用;
(3)與牛血清白蛋白(BSA)的肽骨架相互作用,防止BSA熱變性;
(4)作為銅相關分析的緩沖組分之一;
(5)用作緩沖炭酵母提取物培養基的組成成分;
(6)制備MOPSO-乙醇緩沖體系以固定尿液來源的細胞;
(7)用作測定生物治理海洋原油副產物的緩沖體系。
(2)在熒光光譜法,分光光度法和等溫滴定量熱法中使用;
(3)與牛血清白蛋白(BSA)的肽骨架相互作用,防止BSA熱變性;
(4)作為銅相關分析的緩沖組分之一;
(5)用作緩沖炭酵母提取物培養基的組成成分;
(6)制備MOPSO-乙醇緩沖體系以固定尿液來源的細胞;
(7)用作測定生物治理海洋原油副產物的緩沖體系。
雖然Good’s緩沖液均具有不參加和不干擾生物化學反應過程,對酶化學反應等無抑制作用,不與金屬離子反應等優點。但在具體使用中,幾種嗎啉系列緩沖劑MES,MOPS和MOPSO的應用范圍仍有一定的區別,因此,在進行實驗之前,要考慮其緩沖要求及具體的實驗類型,以選用最合適的緩沖劑。